期刊简介
中华人民共和国卫生部主管,中华医学会、济宁医学院主办。本刊是国家级学术期刊,为《中文核心期刊要目总览》核心期刊、中国科技核心期刊、中国科学引文数据库期刊、中国科技论文统计源期刊,卫生部优秀期刊、中华医学会优秀期刊、中国期刊协会编校质量优秀期刊和山东省优秀期刊。本刊是亚洲行为医学领域惟一学术期刊,也是中国首份以脑科学命名的学术期刊。适合各级医院医护人员及各类院校师生阅读。
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首页>中华行为医学与脑科学杂志

- 杂志名称:中华行为医学与脑科学杂志
- 主管单位:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位:中华医学会 济宁医学院
- 国际刊号:1674-6554
- 国内刊号:37-1468/R
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:中华医学会系列杂志 卫生部优秀期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 哥白尼索引(波兰), 剑桥科学文摘, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中)
酪氨酸激酶受体B基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定
李梅;赵玉;井超;耿德勤;庄柏翔;樊红彬
关键词:酪氨酸激酶受体B, 慢病毒载体, RNA干扰, 神经干细胞
摘要:目的 构建有效抑制酪氨酸激酶受体B(TrkB)基因的RNA干扰慢病毒表达载体.方法 根据大鼠TrkB基因的不同部位设计4对短发卡RNA (short hairpin RNA,shRNA)寡核苷酸片段,克隆到慢病毒干扰载体pXZRNAi 1.0中,构建shRNA慢病毒表达载体pXZRNAi-shTrkB-1,2,3,4.获得较高滴度的慢病毒颗粒后感染大鼠神经干细胞,应用实时荧光PCR和Western blot方法检测对TrkB的干扰效果.结果 酶切鉴定和测序结果提示慢病毒载体的寡核苷酸链插入正确.包装浓缩慢病毒颗粒的滴度为8.6×105 cfu/ml,对神经干细胞感染效率可达80%.与未感染组相比,转染pXZRNAi-shTrkB-3和4的神经干细胞中TrkB mRNA表达水平分别为(66.7±5.5)%和(76.8±4.9)%,TrkB蛋白的表达水平分别为(68.5±4.3)%和(78.2±5.1)%,均差异有统计学意义(P<0.05).结论 成功构建可高效沉默TrkB基因的pXZRNAi-shTrkB慢病毒载体,为研究TrkB在神经干细胞中的作用提供了有力工具.
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