期刊简介
中华人民共和国卫生部主管，中华医学会、济宁医学院主办。本刊是国家级学术期刊，为《中文核心期刊要目总览》核心期刊、中国科技核心期刊、中国科学引文数据库期刊、中国科技论文统计源期刊，卫生部优秀期刊、中华医学会优秀期刊、中国期刊协会编校质量优秀期刊和山东省优秀期刊。本刊是亚洲行为医学领域惟一学术期刊，也是中国首份以脑科学命名的学术期刊。适合各级医院医护人员及各类院校师生阅读。
往期目录
-
2001
-
2002
-
2003
-
2004
-
2005
-
2006
-
2007
-
2008
-
2009
-
2010
-
2011
-
2012
-
2013
-
2014
-
2015
-
2016
-
2017
-
2018
首页>中华行为医学与脑科学杂志
- 杂志名称：中华行为医学与脑科学杂志
- 主管单位：中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华医学会 济宁医学院
- 国际刊号：1674-6554
- 国内刊号：37-1468/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中华医学会系列杂志 卫生部优秀期刊期刊收录：上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 哥白尼索引(波兰), 剑桥科学文摘, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中)
pRluc-hNeurotensin1-R重组真核表达载体的构建及在离体细胞中的表达
蔡欣；陈京；白波
关键词：Neurotensin-R1, 海肾荧光素酶, 真核表达载体, HEK293细胞
摘要：目的 构建与海肾荧光素酶(Rluc)融合的人Neurotensin-R1(Human Neurotensin receptor1,NTS1 or NTSR1)真核表达载体,用于生物发光共振能量转移法检测人NTS与其它受体间的相互作用以及研究Neurotensin-R介导的细胞内信号转导机制.方法 以质粒pcDNA3.1-hNTS1为模板,PCR方法扩增人NTS.扩增的人NTS以及质粒pRluc-pcDNA3.1用Not Ⅰ和Xba Ⅰ双酶切,然后将这2种酶切产物按常规方法连接、转化至大肠杆菌Top10中,该菌在培养箱中孵育12 ～ 16h后,挑取菌落培养,提取质粒,进行酶切鉴定,后进行测序.将测序正确的重组载体用脂质体法转染人胚胎肾(human embryonic kidney293,HEK293)细胞.后,通过共聚焦显微镜观察经过免疫荧光染色的细胞以及Western blot鉴定人Neu-rotensinl-R的表达.结果 通过PCR扩增出一条1257bp的基因片段,序列与GenBank (NM_002531)相同.Western blot中大约90kDa处有一蛋白条带,与预期大小相同.人Neurotensin-R表达在细胞膜上.结论 成功构建了pRluc-hNeurotensinl-R重组表达载体,建立了该质粒转染HEK293的细胞模型.可被用于检测与其它受体间的相互作用以及研究Neurotensin1-R介导的细胞内信号转导机制,这将有助于探究疾病的发病机制及开发新的药物靶点.
友情链接